راهنماي انجام آزمايش تستCAMP

راهنماي انجام آزمايش

تستCAMP

1-  هدف :

 شناسايي و افتراق استرپتوكوك گروه B ( آگالاكتيه ) از ساير استرپتوكوكها

2-  اساس آزمايش:

استرپتوكوك گروه B پروتئين خارج سلولي به نام CAMP factor  ترشح مي نمايد كه با بتا ليزين استافیلوکوک ارئوس بصوررت سينرژيك عمل نموده وسبب افزايش ليز گلبول هاي قرمز خون مي شود.

-        حساسيت اين تست بسيار بالا است و حتي سويه هاي بدون هموليز استرپتوكوك گروه B  (در11 %  موارد )، CAMP مثبت مي باشند.

3-  نمونه اوليه :

 - كشت تازه ميكروبي ( 24-18 ساعته )

4- مواد و ابزار لازم :

-       پليت بلاد آگار حاوي 5% خون گوسفند

-       استاف اورئوس بتا هموليتيك ATCC (25923 ) يا استاف اورئوس بتا هموليتيك جدا شده از بيمار

5-  روش انجام كار  :

-       ابتدا در وسط پليت بلادآگار يك خط مستقيم از استاف اورئوس مولد بتا ليزين راكشت مي دهيم.

-       سپس استرپتوكوك مورد نظر را عمود بر خط كشت استاف ارئوس كشت داده بطوريكه اين دو با هم برخورد و تداخل نكنند. (مي توان چند ميكروار گانيسم را به فاصله 4-3ميليمتر كشت داد.)

-       پليت را به مدت 24-18 ساعت در اتوو C ‍35⁰ در حضور O₂ انكوبه مي نماييم.

-       مشاهده هموليز بتا، شبيه نوك فلش، در محلی که  دوسويه استاف اورئوس و سويه مشكوك به هم نزديک می شوند، نشان دهنده تشديد هموليز بتا و تست CAMP مثبت  است.

6-تداخلات :

اگر پليت تست در كندل جار يا اتو CO₂ و يا در شرايط بي هوازي انكوبه شود بعضي از استرپتوكوك هاي گروه A ايجاد واكنش CAMP مثبت مي كنند، بنابراين پليت تست، بايد حتماً در حضور O₂اتوو گذاري شود.

7-  برنامه  QC  :

سويه كنترل مثبت  : استرپتوكوك گروه B

سويه كنترل منفي  : استرپتوكوك گروه A واسترپتوكوك Bovis

منبع : آزمایشگاه مرجع سلامت  كد:W-LM23/00